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液相色譜常見問題及處理辦法
更新時(shí)間:2011-04-02   點(diǎn)擊次數(shù):2263次

問:用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,有時(shí)發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?

答:關(guān)于漂移問題:

1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定

2. 流動(dòng)相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等

3. 柱子未平衡好,需對柱子進(jìn)行更長時(shí)間的平衡

關(guān)于快速變化問題

1. 流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設(shè)定流速,使之保持穩(wěn)定

2. 泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。

3. 流動(dòng)相不合適,解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合

問: 色質(zhì)聯(lián)用中毛細(xì)柱的選擇應(yīng)注意什么問題?

答: 1. 柱效要高

2. 熱穩(wěn)定性好

3. 化學(xué)惰性強(qiáng)

具體選擇應(yīng)注意

1. 柱極性。根據(jù)分析樣品選擇不同極性的柱子進(jìn)行分析

2. 柱子內(nèi)徑。內(nèi)徑大小決定柱容量

3. 液膜厚度。分析樣品溫度不一樣,對膜厚有不同要求,溫度高液膜要厚,溫度低液膜要薄

4. 柱長度。柱越長,柱效越高,分離效果越好,但也存在吸附問題,柱子過長,分析時(shí)間長,因此要根據(jù)樣品考慮柱子長度

5. 外涂層(柱體)的選擇。

6. 另外還有儀器型號、分析對象等因素

問:液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?

答: 1. 篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

2. 存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子

問:從那些方面可以簡單判別毛細(xì)管柱子的熱穩(wěn)定性好壞?

答: 1. 分配容量(或容量因子)K,好的柱子在高溫運(yùn)行后,分配容量K不應(yīng)有明顯的下降,否則,說明柱子的熱穩(wěn)定性不好

2. 理論塔板數(shù)n,熱穩(wěn)定性好的柱子經(jīng)受高溫后,理論塔板數(shù)應(yīng)基本保持恒定

3. 柱子的極性。熱穩(wěn)定性好的柱子,高溫前后極性變化不大,具體表現(xiàn)為保留指數(shù)I值沒有大的變化。

4. 噪聲。熱穩(wěn)定性好的柱子在高溫下使用后,噪聲不能增加。

5. 柱子的去活層,毛細(xì)管柱子涂固定液前內(nèi)部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質(zhì)量好的毛細(xì)管柱子高溫后,去活層不應(yīng)該變化,表現(xiàn)在對強(qiáng)極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。

問:為什么進(jìn)樣器內(nèi)的玻璃襯套會對色譜行為造成影響?

答:進(jìn)樣器內(nèi)的玻璃襯套主要有下列作用:

1. 提供一個(gè)溫度均勻的汽化室,防止局部過熱。

2. 玻璃的惰性不不銹鋼好,減少了在汽化期間樣品分解的可能性。

3. 易于拆換清洗,以保持清潔的汽化室表面,一些痕量非揮發(fā)性組分會逐漸積累殘存于汽化室,高溫下會慢慢分解,使基流增加,噪聲增大,通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。

4. 可根據(jù)需要選擇管壁厚度及內(nèi)徑適宜的玻璃襯套,以改變汽化室的體積,而不用更換整個(gè)進(jìn)樣加熱塊。

從以上幾個(gè)方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。

問:毛細(xì)管色譜分流進(jìn)樣時(shí),非線性分流的主要原因是什么?name=\"6\">

答:1. 進(jìn)樣器溫度太低,樣品汽化不*,發(fā)生分級分流。

 

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