熒光定量PCR試劑盒的特征及注意事項(xiàng)
一、熒光定量PCR試劑盒的特征：
1、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
2、特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增。
3、重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線(xiàn)重合度高，受干擾影響少。
4、擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線(xiàn)Ct值低，起峰快，效率高。
5、所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
二、熒光定量PCR試劑盒的注意事項(xiàng)：
請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA（將試劑盒中提供的RNaseA全部加入），混勻，置于標(biāo)準(zhǔn)溫度保存。
2、使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明先在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇。
3、使用前請(qǐng)先檢查平衡液BL、溶液是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在標(biāo)準(zhǔn)水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
4、注意不要直接接觸溶液，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。
5、所有離心步驟均為使用常規(guī)臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心，速度為標(biāo)準(zhǔn)。
6、提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。
7、實(shí)驗(yàn)前使用平衡液BL處理吸附柱，可以較大限度激活硅基質(zhì)膜，提高得率。
8、用平衡液BL處理過(guò)的柱子當(dāng)天使用，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響效果。
總結(jié)：熒光定量PCR試劑盒的特征及注意事項(xiàng)，看完本文您就應(yīng)該有了基本的認(rèn)識(shí)和了解相信大家都明白了吧！總的來(lái)說(shuō)，希望對(duì)大家有所幫助。
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